ВЭЖХ и УВЭЖХ: в чём разница и что выбрать

1. ПРИНЦИП РАБОТЫ ВЭЖХ

Высокоэффективная жидкостная хроматография (ВЭЖХ, HPLC) основана на разделении компонентов смеси между неподвижной фазой (сорбент в колонке) и подвижной фазой (элюент), прокачиваемой насосом под давлением. Разделение достигается за счёт различного сродства компонентов к неподвижной фазе.

Стандартные ВЭЖХ-системы работают при давлении до 400 бар, размер частиц сорбента — 3–5 мкм. Это обеспечивает хорошее разрешение и широкую применимость, но время анализа составляет 15–30 минут.

2. ТЕХНОЛОГИЯ УВЭЖХ (UHPLC)

Ультравысокоэффективная жидкостная хроматография (УВЭЖХ, UHPLC) — развитие классической ВЭЖХ с использованием субмикронных частиц сорбента (менее 2 мкм) и рабочим давлением до 1300 бар. Ключевые характеристики УВЭЖХ:

• размер частиц неподвижной фазы: 1,7–1,9 мкм;
• рабочее давление: 600–1300 бар (в зависимости от системы);
• скорость потока: 0,2–0,8 мл/мин при аналитических колонках 2,1 мм;
• объём системы значительно снижен — уменьшен мёртвый объём насоса и инжектора.

Результат: в 3–10 раз более короткое время анализа при том же или лучшем разрешении, значительная экономия органических растворителей.

3. СРАВНЕНИЕ ВЭЖХ И УВЭЖХ

Основные различия между классической ВЭЖХ и УВЭЖХ:

• Давление: ВЭЖХ — до 400 бар, УВЭЖХ — до 1300 бар.
• Размер частиц: ВЭЖХ — 3–5 мкм, УВЭЖХ — 1,7–2 мкм.
• Время анализа: ВЭЖХ — 15–40 мин, УВЭЖХ — 3–10 мин.
• Расход растворителей: ВЭЖХ — выше, УВЭЖХ — снижен в 3–5 раз.
• Чувствительность: УВЭЖХ даёт более узкие пики и лучшее отношение сигнал/шум.
• Стоимость системы: УВЭЖХ значительно дороже в приобретении.

4. КОГДА ВЫБИРАТЬ УВЭЖХ

УВЭЖХ оправдан в случаях, когда:

• необходима высокая производительность — большой поток образцов (50+ проб в день);
• требуется максимальная чувствительность и разрешение для следовых количеств;
• лаборатория работает в режиме UHPLC-MS или UHPLC-MS/MS для фармацевтики;
• важна экономия органических растворителей (экологические и экономические соображения).

Классическая ВЭЖХ остаётся оптимальным выбором для большинства рутинных задач, перевода старых методик без ревалидации, а также когда бюджет на оборудование ограничен.

5. СИСТЕМЫ ВЕДУЩИХ ПРОИЗВОДИТЕЛЕЙ

Ведущие производители предлагают как классические ВЭЖХ-системы, так и УВЭЖХ:

• Agilent: 1260 Infinity II (ВЭЖХ), 1290 Infinity II (УВЭЖХ, до 1300 бар).
• Shimadzu: Nexera серии LC-40 (УВЭЖХ), LC-20 (ВЭЖХ), Prominence LC-20А.
• Waters: Alliance e2695 (ВЭЖХ), ACQUITY UPLC H-Class / I-Class (УВЭЖХ).
• Thermo Fisher: Vanquish Horizon (УВЭЖХ), UltiMate 3000 (ВЭЖХ).

Все системы совместимы с детекторами DAD/PDA, флуоресцентными, рефрактометрическими и масс-спектрометрическими.

6. ВЫБОР СИСТЕМЫ ВЭЖХ/УВЭЖХ: СПЕКТР ТЕСТ

Компания «Спектр Тест» помогает выбрать оптимальную хроматографическую систему с учётом задач лаборатории, действующих методик и планируемой производительности. Мы поставляем системы Shimadzu, Agilent, Waters и обеспечиваем полный цикл сопровождения.

Для консультации по выбору ВЭЖХ или УВЭЖХ звоните: +7 (908) 107-56-48 или пишите на info@sp-test.ru.